Kit d'extraction d'acide nucléique (méthode des billes magnétiques)

Utilisation prévue

Ce produit est destiné à l'extraction, à l'enrichissement et à la purification des acides nucléiques. L'extraction est destinée au diagnostic clinique in vitro.

Principe

Des acides nucléiques de haute qualité peuvent être séparés et purifiés à partir d'échantillons complexes grâce à un système tampon unique composé d'une solution de lyse, d'une solution de lavage A et d'une solution de lavage B avec fonction de séparation. Les billes magnétiques intégrées présentent une forte affinité avec les acides nucléiques dans certaines conditions. Elles libèrent les acides nucléiques absorbés lorsque les conditions changent. Ce kit permet d'extraire des acides nucléiques avec une grande pureté et une qualité stable, ce qui est adapté aux applications sensibles en aval, telles que la qPCR en temps réel.

Stockage et stabilité

Conserver le kit à 15-30℃ et à l'abri de la lumière pendant 6 mois.

Transporter à température ambiante.

Date de production et date de péremption : Voir l'étiquette pour plus de détails.

Appareils applicables

Fonctionnement manuel : centrifugeuse, mélangeur à température constante, support magnétique de 2 ml (séparateur magnétique).

Exigences relatives aux spécimens

1. Type d'échantillon

salive.

2. Collecte d'échantillons

Rincez-vous la bouche à l'eau claire 30 minutes avant le prélèvement (il est interdit de prélever immédiatement après le rinçage), appuyez le bout de votre langue contre la racine des dents maxillaires ou mandibulaires pour enrichir la salive, puis crachez doucement la salive dans l'entonnoir ovale jusqu'à ce que la salive liquide (sans bulles) atteigne la ligne de remplissage de 2 ml. Dévissez soigneusement l'entonnoir du tube de prélèvement (veillez à ce que le tube soit bien droit pendant l'opération). Revissez le bouchon rouge et fermez hermétiquement le tube de prélèvement. Vérifiez que le tube de prélèvement est en bon état et qu'il n'y a pas de débordement d'échantillon, comme un tube fissuré ou un couvercle ouvert. Jetez l'entonnoir usagé.

Procédure de test

1. Prétraitement des échantillons

Centrifuger l'échantillon de salive à 3000 tr/min à 4℃ pendant 10 min et recueillir le surnageant dans un nouveau tube à centrifuger (veiller à ne pas transférer le précipité) ; Le tube à centrifuger a été centrifugé à 13000 tr/min à 4℃ pendant 2 min et le surnageant recueilli a pu être extrait de l'acide nucléique de l'échantillon.

2. Extraction manuelle

2.1 échantillon de craquage

Ajoutez 300 μL d'échantillon (l'échantillon doit être équilibré à température ambiante), 20 μL de solution de protéinase K et 500 μL de tampon de lyse dans un tube à centrifuger de 1,5 mL, vortexez pendant 10 secondes, puis placez-le sur un mélangeur à température constante à 80 ℃ et 1200 tr/min pendant 4 min.

2.2 Adsorption d'acide nucléique

Ajoutez 10 μL de tampon de billes magnétiques au tube à centrifuger, vortexez pendant 10 secondes, puis placez-le sur un mélangeur à température constante à température ambiante et 1200 tr/min pendant 4 min.

Placez le tube à centrifuger sur le support magnétique et, une fois les billes magnétiques complètement absorbées, absorbez soigneusement tout le liquide.

2.3 Rinçage de l'échantillon 1

Ajoutez 500 μL de tampon de lavage A dans le tube à centrifuger, vortexez pendant 10 secondes, puis placez-le sur un mélangeur à température constante à température ambiante et 1200 tr/min pendant 2 min.

Placez le tube à centrifuger sur le support magnétique et, une fois les billes magnétiques complètement absorbées, absorbez soigneusement tout le liquide.

2.4 Rinçage de l'échantillon 2

Ajoutez 500 μL de tampon de lavage B dans le tube à centrifuger, vortexez pendant 10 secondes, puis placez-le sur un mélangeur à température constante à température ambiante et 1200 tr/min pendant 2 min.

Placez le tube à centrifuger sur le support magnétique et, une fois les billes magnétiques complètement absorbées, absorbez soigneusement tout le liquide.

2.5 Élution de l'acide nucléique

Séchez le tube à centrifuger pendant 2 à 5 minutes pour vous assurer qu'il n'y a pas de résidus d'eau.

Ajoutez 50 μL de tampon d'élution dans le tube à centrifuger, vortexez pendant 10 secondes, puis placez-le sur un mélangeur à température constante à 56℃ et 1200 tr/min pendant 5 min.

Placez le tube à centrifuger sur le support magnétique et, une fois les billes magnétiques adsorbées, récupérez la solution d'acides nucléiques dans un nouveau tube à centrifuger et conservez-la à -20℃ ou à -80℃ pendant une longue période.